各种原因导致的急、慢性肾损伤患病率和死亡率逐年攀升，预计到2040年将跃升为全球第五大死因，严重威胁人类健康，早期防控并有效干预刻不容缓。目前尚缺乏能够阻断疾病进程并促进肾脏再生修复的精准策略。

东南大学附属中大医院 刘必成教授

细胞外囊泡（EV）是细胞分泌的由脂质双分子包绕形成的纳米级膜囊泡。籍借其良好的循环稳定性、生物相容性和可修饰性，EV被认为是极具潜力的新一代药物递送载体。过去十年，我们围绕肾脏病进展机制和EV靶向治疗开展系统研究，阐明了EV介导的细胞间对话是肾小管间质炎症形成的新机制；建立了基于EV的肾脏病靶向抗炎治疗新策略，开发了基于EV的小分子药物、细胞因子和小核酸药物肾脏靶向递送系统，成功构建了以EV为核心的精准治疗新体系。

1.建立MSC-EV规模化生产技术体系：MSC-EV的临床转化仍受制于规模化生产与质量控制等关键瓶颈。我们率先系统评估了不同培养条件对MSC及其EV特性的影响。结果表明，相较传统FBS体系，人血小板裂解物（HPL）培养不仅显著提升MSC扩增能力并延缓细胞衰老，同时提高EV产量并增强其功能稳定性。多组学分析进一步显示，HPL来源MSC-EV在分子组成上具有更高一致性，并富含多种与组织修复相关的活性因子。在肾缺血再灌注损伤模型中，HPL-MSC-EV表现出更优的促修复效果，为提升产品一致性与功能稳定性提供了重要技术路径。

为了进一步推动MSC-EV的临床转化，我们构建了基于微载体的MSC三维悬浮培养系统，并结合切向流过滤与尺寸排阻色谱的纯化策略，实现EV产量的显著提升，同时保持其分子组成与生物学功能的稳定性。多组学结果显示，3D培养来源MSC-EV在核酸及蛋白组成上与传统2D培养总体一致，并在细胞稳态调控与损伤修复中具有显著效应。围绕MSC-EV质量控制体系建设，团队在国内牵头制定了MSC-EV注射剂及冻干制剂团体标准，推动本领域标准化发展。

2.证明MSC-EV具有良好的长期安全性：我们从体内分布、药代动力学及组织病理等多个层面系统评估了MSC-EV重复给药的安全性。IVIS成像显示，MSC-EV主要分布于肝脏，而PEG-Liposome则主要在脾脏和肝脏积累。药代动力学分析提示，两者血液半衰期相近，均小于4小时。多次给药后，血液学及生化指标检测显示，PEG-Liposome可诱导一定程度的炎症反应及肝功能损伤，而MSC-EV未见明显异常。组织病理学分析显示，MSC-EV对主要脏器形态结构无显著影响，而PEG-Liposome可引发肺、肝、肾等组织的炎症细胞浸润，表明MSC-EV在长期重复给药条件下表现出良好的生物相容性与安全性。

3.阐明MSC-EV改善肾小管损伤及小管间质炎症的作用机制：在肾脏缺血再灌注损伤（IRI）模型中，MSC-EV显著改善肾功能并减轻肾小管损伤。机制研究表明，MSC-EV富含miR-125b-5p，可通过靶向肾小管上皮细胞（TEC）中的p53，缓解G2/M期阻滞并减少细胞凋亡，从而促进肾组织修复。多组学联合分析进一步发现，IRI可诱导肾脏固醇代谢紊乱并激活胆固醇25-羟化酶（CH25H）/25-羟胆固醇（25HC）代谢轴，进而触发脂质过氧化和铁死亡。MSC-EV通过递送miR-26b-5p抑制CH25H表达，调控胆固醇氧化代谢并恢复氧化还原稳态，从而有效减轻肾小管铁死亡并促进损伤修复。在脓毒症相关AKI模型中，MSC-EV可改善动物存活率、肾功能及全身炎症反应，并减轻肾小管结构损伤。MSC-EV可通过递送miR-125a-5p抑制TNFR2表达，从而减轻焦亡并缓解炎症损伤。

综上所述，临床前研究显示MSC-EV治疗肾脏病具有显著的疗效，它具有抗炎、抗纤维化和促再生等多靶点修复机制，作为无细胞疗法可规避活细胞相关的致瘤与微血管栓塞风险。MSC-EV可冻干、即用型的成药特性及易于标准化生产的优势，将为“货架式”临床应用提供极大便利。未来要重视不同来源和制备工艺导致MSC-EV的异质性、体内肾脏靶向性增强和相关质量标准与效力评价体系建设，突破标准化生产、靶向递送及监管瓶颈，积极推动MSC-EV早日从基础研究走向临床。