嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法在B细胞介导的自身免疫性疾病中具有潜在治疗价值。然而，传统的离体CAR-T制备工艺存在流程复杂、耗时较长、成本高昂等局限，且治疗前常需进行清淋化疗，增加了治疗相关毒性。为突破这一瓶颈，华中科技大学同济医学院附属同济医院田代实团队联合深圳市济因生物科技有限公司，采用“现货型”（off-the-shelf）慢病毒载体JY231开展Ⅰ期临床试验，以评估该策略在难治性神经免疫病治疗中的可行性与安全性，相关研究成果于近日发表于NEJM。

研究纳入16例对常规治疗无效的难治性神经免疫病患者（包括进展型多发性硬化、MOG抗体相关疾病、全身型重症肌无力和特发性炎性肌病）。所有患者接受单次JY231输注（剂量为2.0×10⁹转导单位），未进行清淋化疗。研究从药代动力学、靶向性及安全性三个维度评估了该策略的可行性。

1.体内扩增与药代动力学

输注后，所有16例患者体内均检测到CAR-T细胞的扩增。载体拷贝数（VCN）在输注后第11 d达到中位峰值，为53 962.5拷贝/微克DNA。同时，慢病毒衣壳蛋白p24在外周血中迅速清除，至第4 d已无法检测，提示游离病毒颗粒在体内快速消除，避免持续病毒暴露。

2.靶向性与解剖屏障穿透

在靶向精确性方面，单细胞RNA测序和流式细胞术显示，超过99%的CAR⁺细胞被鉴定为T细胞，提示载体对目标细胞具有高度特异性转染。值得注意的是，在进展型多发性硬化和MOGAD患者中，脑脊液（CSF）内检测到的载体拷贝数高于外周血和骨髓，提示该载体具备穿透血脑屏障的能力。

3.安全性特征

治疗中未观察到免疫效应细胞相关神经毒性综合征（ICANS）或局部免疫效应细胞相关毒性综合征（LICATS）。11例患者（69%）出现1级细胞因子释放综合征（CRS），表现为短暂的发热，均在2周内自行缓解。血液学方面，输注后24 h内观察到一过性的急性淋巴细胞减少伴随中性粒细胞短暂升高，但该波动迅速自发恢复。3例患者出现可逆的3级或4级中性粒细胞减少，未观察到长期医源性骨髓抑制。此外，整合位点分析显示，CAR基因呈多克隆分布，主要整合于基因内含子区域，未观察到与已知癌基因相关的克隆性扩增。

在药代动力学评估的基础上，研究进一步分析了治疗对免疫系统的影响。

1.B细胞耗竭

体内扩增的CAR-T细胞实现了对外周血中B细胞的快速且完全清除。同时，研究观察到血清免疫球蛋白水平出现一过性下降，进一步佐证了靶点结合的有效性。

2.B细胞重建与克隆型替换

输注2个月以后，外周血中的B细胞开始重新出现。流式细胞术分析显示，重新建群的B细胞以幼稚B细胞为主。更为关键的分子证据来自单细胞B细胞受体（BCR）测序：结果显示，治疗后的B细胞受体克隆型发生了完全替换，与基线克隆型不同。这一发现提供了系统性免疫重置的分子证据。

在中位随访6个月时，各疾病队列中观察到部分临床与生物学指标的改善趋势，但均为初步观察信号。

进展型多发性硬化：随访过程中发现，扩展残疾状态量表（EDSS）评分的下降趋势，部分患者的运动和认知功能有所改善。影像学方面，脑脊液中的神经轴突损伤标志物（神经丝轻链）和鞘内IgG合成标志物（κ游离轻链指数）出现下降，PET-MRI显示小胶质细胞活化程度降低。所有7例患者在3至6个月随访时未观察到新的钆增强或T2加权MRI病灶。

MOGAD：观察到血清MOG特异性自身抗体滴度出现下降趋势。

重症肌无力：定量重症肌无力评分（QMG）似乎出现下降，且该趋势似乎与抗乙酰胆碱受体抗体的下降存在相关性。

特发性炎性肌病：观察到8项徒手肌力测试（MMT-8）评分的提高趋势，血清肌酸激酶水平下降，影像学显示肌肉炎症有所减轻，且致病性抗体水平呈下降趋势。

上述发现为该慢病毒载体体内生成CAR-T的策略提供了概念验证（proof-of-concept）证据。研究表明，JY231能够在难治性神经免疫病患者体内诱导CAR-T细胞扩增，具备穿透血脑屏障的能力，并表现出可控的安全性特征。其介导的B细胞克隆型完全替换，从分子层面提示了免疫系统重建的可能性。

但需明确指出，作为一项小样本、单臂的Ⅰ期试验，所有疗效信号均为初步观察趋势，其长期疗效与安全性仍需通过更大规模、随访时间更长的随机对照试验予以验证。目前的结果支持该策略值得进一步研究，以评估其作为难治性神经免疫病治疗手段的潜力。